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组织来源 |
脑 |
规格 |
5×10⁵Cells/T25培养瓶 |
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细胞分类 |
兔原代细胞 |
培养条件 |
气相：空气，95%；CO2，5% |
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生长特性 |
贴壁 |
细胞形态 |
神经元细胞样 |
细胞简介：
兔下丘脑神经元细胞分离自下丘脑；下丘脑又称丘脑下部，位于大脑腹面、丘脑的下方，是调节内脏活动和活动的较神经所在。下丘脑自前向后可分三部﹐即前部（又名视前区和视上区）﹑中部（结节区）和后部（体区）。下丘脑具有许多细胞核团和纤维束﹐与神经系统的其它部位具有密切的相互联系。它不仅通过神经和血管途径调节脑垂体前﹑后叶的分泌和释放﹐而且还参与调节自主神经系统﹐如控制水盐代谢﹑调节体温﹑摄食﹑睡眠﹑生殖、内脏活动以及情绪等。下丘脑神经元与来自其他部位的神经纤维有广泛的突触联系，可以接受很多神经冲动，为系统和神经系统的中心。它们能调节垂体前叶功能，合成神经垂体及控制自主神经和植物神经功能。故提取下丘脑神经元进行体外培养，建立下丘脑神经元体外实验平台具有重要意义。
方法简介：
实验室分离的兔下丘脑神经元细胞采用胰蛋白酶消化法结合神经元培养基培养、化学试剂抑制法筛选制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测
实验室分离的兔下丘脑神经元细胞经β-Tubulin-Ⅲ荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
培养信息：
包被条件：PLL（0.1mg/ml）
培养基：含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等
换液频率：每2-3天换液一次
生长特性：贴壁
细胞形态：神经元细胞样
传代特性：属于终末分化细胞；属于不增殖细胞群
消化液：0.25%胰蛋白酶
培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%
兔下丘脑神经元细胞体外培养周期有限；建议使用配套的生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态。
(1)原代细胞的培养方法
原代细胞的培养也叫初代培养是从供体取得组织细胞在体外进行的培养，是建立细胞系的步，是一项基本技术。原代细胞接近和能反映体内生长特性，适宜用于敏感性试验、细胞分化等实验研究。
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养，或经细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。
原代细胞的分离方法：
一、悬浮细胞的分离方法
组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料，简单的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞。二、实体组织材料的分离方法
对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液，可采用机械分散法（物理裂解）和消化分离法。
（一）机械分散法
特点:简便、快速,但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。
（二）消化分离法
组织消化法是把组织剪切成较小团块（或糊状），应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松，由块状变成絮状，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液，接种培养后，细胞容易贴壁生长。
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Cezanne蛋白抗体 Cezanne
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RNA探针位素（[α32P]CTP）聚合酶标记试剂盒
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HLA-DRB4
α/β水解酶4抗体
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