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细胞简介:
兔海绵体平滑肌细胞分离自海绵体组织;海绵体,又称海绵体肌,是硬的平滑肌和结缔组织。海绵体是一种勃起组织,外面包有坚厚的白膜,内部由结缔组织和平滑肌组成海绵状支架,其腔隙与血管相通。它主要包括海绵体内皮细胞、平滑肌细胞和成纤维细胞3种细胞成分。其中平滑肌细胞和成纤维细胞镶嵌于海绵体细胞外基质的胶原中,在消化海绵体组织时,胶原酶的作用主要是松解海绵体内皮细胞与基膜的联系,破坏海绵体内皮细胞间的紧密连接。因此可用胶原酶分离出海绵体平滑肌细胞。平滑肌,是非横纹肌的肌肉组织。分布在人体动脉和静脉血管壁、膀胱、、男性和女性生殖道、消化道、呼吸道、眼睛的睫状肌和虹膜。平滑肌细胞原代分离培养3天后,可见细胞贴壁伸展,细胞形态大小不一,呈梭形、不规则形、三角形或扇形,核卵圆形、居中;2周后细胞汇合,多数细胞伸展呈长梭形,胞浆丰富,有分枝状突起,细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长,高低起伏;细胞密度低时,常交织成网状;密度高时,则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快,4-6天即可汇合,并保持上述形态学特征和生长特点。
商品属性:
产品名称 |
种属 |
兔 |
|
组织来源 |
海绵体 |
规格 |
5×10⁵Cells/T25培养瓶 |
货号 |
A01X2115 |
细胞形态 |
成纤维细胞样 |
培养条件 |
气相:空气,95%;CO2,5% |
生长特性 |
贴壁 |
方法简介:
实验室分离的兔海绵体平滑肌细胞采用胶原酶消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测
实验室分离的兔海绵体平滑肌细胞经α-SMA荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
培养信息:
培养基:含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:成纤维细胞样
传代特性:可传3-5代左右;3代以内状态佳
消化液:0.25%胰蛋白酶
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%
兔海绵体平滑肌细胞体外培养周期有限;建议使用配套的生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的佳培养状态。
原代细胞的培养条件:
① 静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
a 细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性
b 细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L。
c 培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养。
d 胎牛血清浓度为10%-80%。
e 应在37℃5% CO2的培养箱中培养。。
f 在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮。
g 待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液
h 用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
② 悬浮细胞的培养要求
a 原代培养时要尽量去除红细胞
b 短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行
c 细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验。
d 长期培养时,细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长。
f 细胞换液一般每隔3天需半量换液一次
g 细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。
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