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细胞简介:
大鼠胰腺导管上皮细胞分离自胰腺组织;胰腺分为外分泌腺和腺两部分。外分泌腺由腺泡和腺管组成,腺泡分泌胰液,腺管是胰液排出的通道。胰液中含有、胰蛋白酶原、脂肪酶、淀粉酶等。胰液通过胰腺管排入十二指肠,有消化蛋白质、脂肪和糖的作用。腺由大小不同的细胞团──胰岛所组成,胰岛主要由4种细胞组成:α细胞、β细胞、γ细胞及PP细胞。α细胞分泌胰高血糖素,升高血糖;β细胞分泌胰岛素,降低血糖;γ细胞分泌,以旁分泌的方式抑制α、β细胞的分泌;PP细胞分泌胰多肽,抑制胃肠运动、胰液分泌和胆囊收缩。成体胰腺导管上皮细胞作为胰腺前体细胞,已证实具多向分化潜能,在合适的外源性刺激下可分化成胰岛样细胞,胰腺导管上皮细胞转分化的胰岛样细胞原性如何,转分化的胰岛样细胞在糖尿病时是否发生排斥反应,对干细胞临床糖尿病具有重要意义。
商品属性:
产品名称 |
种属 |
大鼠 |
|
组织来源 |
胰腺组织 |
规格 |
5×10⁵Cells/T25培养瓶 |
货号 |
A01X1617 |
细胞形态 |
上皮细胞样 |
培养条件 |
气相:空气,95%;CO2,5% |
生长特性 |
贴壁 |
方法简介:
公司实验室分离的大鼠胰腺导管上皮细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合消化法结合密度梯度离心法、差速贴壁法,并通过上皮细胞培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测
公司实验室分离的大鼠胰腺导管上皮细胞经Cytokeratin-19荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
培养信息:
包被条件 鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 上皮细胞样
传代特性 可传1-2代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
原代细胞的培养条件:
① 静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
a 细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性
b 细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L。
c 培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养。
d 胎牛血清浓度为10%-80%。
e 应在37℃5% CO2的培养箱中培养。。
f 在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮。
g 待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液
h 用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
② 悬浮细胞的培养要求
a 原代培养时要尽量去除红细胞
b 短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行
c 细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验。
d 长期培养时,细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长。
f 细胞换液一般每隔3天需半量换液一次
g 细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。
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