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细胞简介:
大鼠角膜基质细胞分离自眼角膜组织;角膜位于眼球前壁的一层透明膜,约占纤维膜的前1/6,从后面看角膜呈正圆形,从前面看为横椭圆形。角膜厚度各部分不尽相同,中央部薄。角膜有十分敏感的神经末梢,如有外物接触角膜,眼睑便会不由自主地合上以保护眼睛。为了保持透明,角膜并没有血管,透过外界空气、泪液及房水获取养份及氧气。角膜分为五层,由前向后依次为:上皮细胞层、前弹力层、基质层、后弹力层、内皮细胞层。角膜基质层是角膜的主要组成部分,占据角膜厚度的90%,由角膜基质细胞、胶原纤维和细胞外基质构成。角膜基质层缺损的修复主要由角膜基质细胞的增殖及分泌细胞外基质完成。角膜基质层具有结构规整,透明度高的特点,正常情况下角膜基质细胞分泌组成基质层的成分,维持角膜的透明度,此细胞对于角膜损伤的修复具有重要意义。角膜基质细胞,存在于角膜基质层中,在正常情况下,处于静止状态。但当角膜损伤时,不同上皮来源的因子及环境信号,将影响角膜基质细胞的应答反应,决定着角膜能否完全被修复。
商品属性:
产品名称 |
种属 |
大鼠 |
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组织来源 |
眼角膜组织 |
规格 |
5×10⁵Cells/T25培养瓶 |
货号 |
A01X1725 |
细胞形态 |
梭形、多角形 |
培养条件 |
气相:空气,95%;CO2,5% |
生长特性 |
贴壁 |
方法简介:
公司实验室分离的大鼠角膜基质细胞采用胶原酶消化后组织贴块法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测
公司实验室分离的大鼠角膜基质细胞经Vimentin荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
培养信息:
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 梭形、多角形
传代特性 可传2-3代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
原代细胞的培养条件:
① 静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
a 细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性
b 细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L。
c 培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养。
d 胎牛血清浓度为10%-80%。
e 应在37℃5% CO2的培养箱中培养。。
f 在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮。
g 待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液
h 用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
② 悬浮细胞的培养要求
a 原代培养时要尽量去除红细胞
b 短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行
c 细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验。
d 长期培养时,细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长。
f 细胞换液一般每隔3天需半量换液一次
g 细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。
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