(1)原代细胞的培养方法
原代细胞的培养也叫初代培养是从供体取得组织细胞在体外进行的培养，是建立细胞系的步，是一项基本技术。原代细胞接近和能反映体内生长特性，适宜用于敏感性试验、细胞分化等实验研究。
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养，或经细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。
商品属性：
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组织来源 |
脊髓 |
规格 |
5×10⁵Cells/T25培养瓶 |
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细胞分类 |
大鼠原代细胞 |
培养条件 |
气相：空气，95%；CO2，5% |
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生长特性 |
贴壁 |
细胞形态 |
内皮细胞样 |
细胞简介：
大鼠脊髓微血管内皮细胞分离自脊髓组织；脊髓是细细的管束状的神经结构，位于脊柱的椎管内且被脊椎保护；是源自脑的神经系统延伸部分。神经系统的细胞依靠复杂的联系来处理传递信息。脊髓的主要功能是传送脑与外周之间的神经信息。人和脊椎动物神经系统的一部分，在椎管里面，上端连接延髓，两旁发出成对的神经，分布到四肢、体壁和内脏。脊髓的内部有一个H形（蝴蝶型）灰质区，主要由神经细胞构成；在灰质区周围为白质区，主要由有髓神经纤维组成；脊髓是许多简单反射的。脊髓两旁发出许多成对的神经（称为脊神经）分布到全身皮肤、肌肉和内脏器官。微血管又称。分布于各种组织和细胞间的微细的血管。介于微动脉和微静脉之间。平均直径7～9微米，数量极多，成网状分布。管壁由一层内皮细胞及一薄层基膜组成，厚约0.5微米。基膜外面有薄层结缔组织，其中有纤维细胞、巨噬细胞和周细胞等。细的由一个内皮细胞围成管腔，较粗的由2～3个内皮细胞围成。分布于肌肉组织、神经组织和结缔组织中的，内皮细胞间为缝隙连接（缝隙宽150埃），称连续；分布于腺、肾脏等处的，除有缝隙连接外，细胞本身有许多小孔，（孔径800～1000埃），称有孔；分布于肝、脾、骨髓及某些腺的，管腔扩大，称血窦。的管壁薄、通透性大、管径细（8～10微米）、数量多、血流速度慢，这些特点使其成为血液与组织液进行物质交换的场所，又称交换血管。血窦（sinusoid）由管腔扩大而成，窦壁的一般结构与壁相同，由单层内皮细胞构成，内皮细胞膜上有窗孔。不同器官的窦壁结构各有差别。脾血窦的内皮细胞间有较宽裂隙；肝血窦内皮细胞是不连续的，有较宽的细胞隙（0.1～0.5微米）；肝、脾血窦的基膜不完整或无基膜，通透性比大，较大的蛋白质和血细胞可以通过。肝血窦壁内有枯否细胞，脾血窦内外有巨噬细胞，这两种细胞都有吞噬能力，可吞噬血液中的异物、等有害物质，是机体单核巨噬细胞系统的重要组成分。某些腺的血窦有连续的基膜。
方法简介：
实验室分离的大鼠脊髓微血管内皮细胞采用中性蛋白酶 - 胶原酶联合消化法制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测
实验室分离的大鼠脊髓微血管内皮细胞经CD31荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等：
培养信息：
包被条件：PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%）
培养基：含FBS、EGF、bFGF、IGF、VEGF、Heparin、Hydrocortisone、Penicillin、Streptomycin等
换液频率：每2-3天换液一次
生长特性：贴壁
细胞形态：内皮细胞样
传代特性：可传2-3代
消化液：0.25%胰蛋白酶
培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%
大鼠脊髓微血管内皮细胞体外培养周期有限；建议使用配套的生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态。
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嗅球蛋白1抗体 Anti-OLFM1/Noelin
突触结合蛋白相关基因2抗体 Anti-synaptotagmin-2
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大鼠脊髓微血管内皮细胞大鼠白介素6（IL－6）elisa检测试剂盒
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人8异前列腺素F2α(8-iso-PGF2a)elisa分析检测试剂盒
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原代细胞的分离方法：
一、悬浮细胞的分离方法
组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料，简单的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞。二、实体组织材料的分离方法
对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液，可采用机械分散法（物理裂解）和消化分离法。
（一）机械分散法
特点:简便、快速,但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。
（二）消化分离法
组织消化法是把组织剪切成较小团块（或糊状），应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松，由块状变成絮状，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液，接种培养后，细胞容易贴壁生长。