(1)原代细胞的培养方法
原代细胞的培养也叫初代培养是从供体取得组织细胞在体外进行的培养，是建立细胞系的步，是一项基本技术。原代细胞接近和能反映体内生长特性，适宜用于敏感性试验、细胞分化等实验研究。
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养，或经细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。
商品属性：
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组织来源 |
滑膜 |
规格 |
5×10⁵Cells/T25培养瓶 |
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细胞分类 |
大鼠原代细胞 |
培养条件 |
气相：空气，95%；CO2，5% |
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生长特性 |
贴壁 |
细胞形态 |
成纤维细胞样 |
细胞简介：
大鼠滑膜成纤维细胞分离自滑膜组织；滑膜组织是位于关节腔内面的内衬结构，各种关节内均会累及滑膜。而滑膜细胞是维持关节正常功能的重要组织结构，同时在各种关节疾患中也是主要病变部位。骨关节炎(OA)以关节软骨退行性变为特征，其病理改变累及关节的各个组成部分，但绝不仅局限于软骨，还包括软骨下骨、滑膜、半月板和韧带。各组成部分的病理改变相互影响，相互作用，共同加速关节的退变。滑膜细胞是构成滑膜层的大细胞群体，是维持关节正常功能的重要组织结构，它包埋在颗粒状无定性的基质中，基质内有分散的纤维分布。滑膜由A型(巨噬样滑膜细胞)、B型(成纤维样滑膜细胞)以及C型(树突细胞样滑膜细胞)细胞组成。滑膜细胞主要功能：①滑膜细胞产生润滑液成分，并且与关节腔的吸收和血液/润滑液交换有关；②滑膜细胞增生，表现为不依赖于支持物生长，并且分泌大量的效应分子来促进炎症和关节损坏；③是自身自分泌和旁分泌网络中效应因子的一部分。
方法简介：
实验室分离的大鼠滑膜成纤维细胞采用混合酶消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测
实验室分离的大鼠滑膜成纤维细胞经Vimentin荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
培养信息：
培养基：含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率：每2-3天换液一次
生长特性：贴壁
细胞形态：成纤维细胞样
传代特性：可传3代左右
消化液：0.25%胰蛋白酶
培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%
大鼠滑膜成纤维细胞体外培养周期有限；建议使用配套的生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态。
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磷酸化磷脂酰肌醇激酶p85β抗体 Anti-phospho-PIK3R2(Tyr467)
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磷酸化珠蛋白转录因子1抗体
phospho-GATA1 (Ser161)
嗅觉受体5F1抗体
OR5F1
乙型肝炎X蛋白反转录蛋白4抗体 Anti-XTP4
胞内活化的Notch1蛋白抗体 Anti-NOTCH1/activated Notch1
受体表达蛋白5/息肉相关蛋白抗体 Anti-REEP5
钠离子通道蛋白7α/Na+ CP type VIIα抗体 Anti-SCN7A
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大鼠滑膜成纤维细胞LSM5蛋白抗体
LSM5
转录因子BTF3抗体
BTF3
原代细胞的分离方法：
一、悬浮细胞的分离方法
组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料，简单的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞。二、实体组织材料的分离方法
对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液，可采用机械分散法（物理裂解）和消化分离法。
（一）机械分散法
特点:简便、快速,但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。
（二）消化分离法
组织消化法是把组织剪切成较小团块（或糊状），应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松，由块状变成絮状，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液，接种培养后，细胞容易贴壁生长。