(1)原代细胞的培养方法
原代细胞的培养也叫初代培养是从供体取得组织细胞在体外进行的培养，是建立细胞系的步，是一项基本技术。原代细胞接近和能反映体内生长特性，适宜用于敏感性试验、细胞分化等实验研究。
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养，或经细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。
商品属性：
|
组织来源 |
骨骼肌组织 |
规格 |
5×10⁵Cells/T25培养瓶 |
|
细胞分类 |
大鼠原代细胞 |
培养条件 |
气相：空气，95%；CO2，5% |
|
生长特性 |
贴壁 |
细胞形态 |
成纤维细胞样 |
细胞简介：
大鼠骨骼肌细胞分离自四肢肌肉组织；骨骼肌又称横纹肌，肌肉中的一种，约占全身重量的40%。骨骼肌纤维为长柱形的多核细胞，肌膜的外面有基膜紧密贴附。属于横纹肌，横纹肌还包括心肌与内脏横纹肌，其中骨骼肌主要分布于四肢。每块肌肉都是具有一定形态、结构和功能的器官，有丰富的血管、分布，在躯体神经支配下收缩或舒张，进行随意运动。肌肉可根据共形状、大小、位置、起止点、纤维方向和作用等命名。依形态命名的如斜方肌、菱形肌、三角肌、梨状肌等。骨骼肌细胞呈纤维状，不分支，有明显横纹，核很多，且都位于细胞膜下方。肌细胞内有许多沿细胞长轴平行排列的细丝状肌原纤维。每一肌原纤维都有相间排列的明带（Ⅰ带）及暗带（A带）。明带染色较浅，而暗带染色较深。暗带中间有一条较明亮的线称H线。H线的中部有一M线。明带中间，有一条较暗的线称为Z线。两个Z线之间的区段，叫做一个肌节。骨骼肌细胞也称横纹肌细胞，细胞呈纤维状，不分支，有明显横纹，核很多，且都位于细胞膜下方，细胞多呈梭行，具有一定的方向性。骨骼肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展，细胞形态大小不一，呈梭形、不规则形、三角形或扇形，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长，高低起伏；细胞密度低时，常交织成网状；密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快，4-6天即可汇合，并保持上述形态学特征和生长特点。
方法简介：
公司实验室分离的大鼠骨骼肌细胞采用胶原酶消化法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测
公司实验室分离的大鼠骨骼肌细胞经α-Sarcometric actin荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
培养信息：
包被条件 PLL（0.1mg/ml）
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传5代左右；3代以内状态佳
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
公司正在出售的产品：
人B细胞κ 轻肽基因增强子核因子抑制因子ε(NFKBIE)elisa检测试剂盒
大鼠中性粒细胞趋化因子-1（CINC-1）elisa检测试剂盒
细胞CDK4蛋白表达比色法定量检测试剂盒
小鼠Ⅲ型前胶原氨基端肽(PⅢNT)elisa检测试剂盒
阿尔新蓝（ALCIAN BLUE）染色试剂盒
大鼠胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP-3)elisa检测试剂盒免费代测
CASPASE-5蛋白表达ELISA定量检测试剂盒
小鼠Toll样受体2(TLR2)elisa检测试剂盒
胞浆异柠檬酸脱氢酶（ICDHc）测试盒
热休克蛋白70家族蛋白6抗体 HSPA6
溶血磷脂酸受体蛋白2抗体 LPA2
IZUMO1蛋白抗体 IZUMO1
KIAA1737蛋白抗体 KIAA1737
真核翻译起始因子4B抗体 EIF4B
植物肌动蛋白（内参）单克隆抗体 Plant actin(Loading Control)
钙调蛋白激酶激酶α抗体CaMKKα CaMKK1
肝血管**素相关蛋白4抗体 Angiopoietin-like 4
细胞色素P450 4Z2P抗体 CYP4Z2P
细胞周期调控因子P78抗体 MCRS1/p78
zeta相关蛋白70单克隆抗体 ZAP70
β-乳球蛋白抗体 Beta-lactoglobulin
ASTE1蛋白抗体 ASTE1
Beta氨基己糖苷酶beta亚基蛋白A链抗体 HEXB chain A
跨膜蛋白SEMA4B抗体 SEMA4B
联会复合体蛋白3抗体 CTDSPL
面食甘露糖比色法定量检测试剂盒
大鼠骨骼肌细胞犬Bcl-2相关X蛋白(BAX)elisa检测试剂盒
10％Formalin固着液
小鼠巨噬细胞移动因子（MIF）elisa检测试剂盒
大鼠肠脂肪酸结合蛋白(iFABP)elisa检测试剂盒
原代细胞的分离方法：
一、悬浮细胞的分离方法
组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料，简单的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞。二、实体组织材料的分离方法
对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液，可采用机械分散法（物理裂解）和消化分离法。
（一）机械分散法
特点:简便、快速,但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。
（二）消化分离法
组织消化法是把组织剪切成较小团块（或糊状），应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松，由块状变成絮状，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液，接种培养后，细胞容易贴壁生长。