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  • 产品名称:一步法miRNA反转录试剂盒

  • 产品型号:A-PJ1084
  • 产品**:抚生
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简单介绍:
一步法miRNA反转录试剂盒公司正在出售的产品:微量细胞DNA提取试剂盒(磁珠法)磁珠Annealing Buffer for DNA Oligos (10X)HotStart Bst 4.2 SYBR Green Mix(可冻干)核酸外切酶I(E.coli)游离DNA提取试剂盒(中提)宠物粪便核酸采集器(套装)
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商品属性:


货号

规格

产品名称

A-PJ1084-25T

25T

一步法miRNA反转录试剂盒

A-PJ1084-100TX20μl

100TX20μl

一步法miRNA反转录试剂盒

储存条件:


一步法miRNA反转录试剂盒请置于-20°C,可保存 2 年;避免反复冻融

产品介绍:


由于 miRNAs 分子序列较小,仅 20nt 左右,没有 真核生物特有的 Poly(A)尾巴结构,采用传统 Oligo dT 引 物和随机引物很难获得从 miRNA 到 cDNA 的反转录产 物。 公司开发出一套全新的加 A 法 miRNA 反转 录试剂盒,基于 Peter 改良的 miR-Q 技术, 可以对成熟的 miRNA 同时完成加 A 反应和反转录反应, 直接获得含有特异性 tag 和 15(T)的 cDNA 产物(如图 1 所示)。该方法使得 miRNA 反转录与 mRNA 的反转录一 样轻松。直接将提取的 miRNA 与反应缓冲液混合物混合, 并置于 PCR 仪上 1 小时即可获得高浓度的、包含所有 miRNAs 分子的 cDNA 产物。获得的 cDNA 产物适用于 HG miRNA 荧光定量 PCR 试剂盒进行定量检测,该方法 已被大量文献所采用。 

 

操作方法:


1. 按以下组分配制反转录反应液
miRNA(0.01-0.1 μg)or Total RNA 0.1-2 μg
4×One step miRNA RT Solution 5 μl
*10×miRNA RT Primer 2 μl
Rnase Free H2O Up to 20 μl
*特别说明: 10×miRNA RT Primer 引物为
5’-CAGGTCCAGTTTTTTTTTTTTTTTVN-3’,定量扩增
用特异性上下游引物进行扩增,图 2 是以 hsa-miR-21 为
实例说明特异性上下游引物的设计方法
2. 在 PCR 仪上按以下条件进行反应:
 37°C 60min
 95°C 5min
3. 获得 cDNA 产物后使用 HG miRNA 荧光定量 PCR 试剂盒进行 miRNA 定量检测。

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