产品名称：SK-HEP-1细胞

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产品名称：肝癌细胞；SK-HEP-1
形态特性：上皮样

生长特性：贴壁生长

特征特性：SK-HEP-1细胞系已被鉴定为内皮来源。该细胞系为异倍体女性人（XX），染色体在亚三倍体范围内。在裸鼠中，它能形成与肝癌相一致的大细胞癌

培养条件：DMEM(高糖）+10%FBS

传代方法：1:3传代，2-3天换液一次
实验材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培养液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml烧杯2个；
3、50ml离心筒2个 

4、培养皿1个，细胞培养瓶1个 

5、1ml ，200μl移液器各1支；枪头盒2个；无菌玻璃搅拌棒1个 

6、细胞计数板1块； 

7、灭好菌的镊子1把，剪刀1把； 

8、酒精灯1台； 

细胞培养操作规程：

一．培养基及培养冻存条件准备：

1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。

3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。

二．细胞处理：

1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。天换液并检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：

方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

冻存培养基：

冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。

1）细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基，其所含胎牛血清和牛血清比例经过优，可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。 

2）冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基，含10% DMSO，适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。

培养细胞冻存方案：

以下实验方案介绍了培养细胞冻存的一般流程。详细的实验方案，必须参阅针对具体细胞的产品说明书。 

1.配制冻存培养基，于2°C至8°C下储存，直至使用。请注意使用何种冻存培养基取决于所用细胞系。

2.冻存贴壁细胞时，利用传代时所用方法轻柔地使细胞从组织培养容器上脱离下来。用该细胞所需完全培养基重新悬浮细胞。

3.采用血球计数器、细胞计数仪按照台盼蓝拒染法或者使用自动细胞计数仪测定总细胞数和活细胞百分比。根据所需活细胞密度，计算冻存培养基需要量。

4.以大约100-200×g的离心力将细胞悬液离心5至10分钟。在无菌条件下小心倒掉上清液，不要搅动细胞沉淀。

注：离心速度和时间取决于细胞种类。

5.用预冷的冻存培养基重新悬浮细胞沉淀，将其调整至该细胞适合的活细胞密度。

6.将细胞悬液分装到若干冻存管中。分装时，应不时轻轻混合细胞，使其保持均匀的细胞悬液状态。

7.使用可控制降温速度的冷冻装置冷冻细胞，使温度每分钟大约降低1°C。或者，将装有细胞的冻存管放入冻存盒中，然后将冻存盒置于-80°C条件下过夜。 

3--1,2-（消旋体） 99%（剧品）Human matrilysin,MAT ELISA Kit  人质裂解蛋白/质溶素兔纤连蛋白富亮氨跨膜蛋白2(FLRT2)酶联吸附测定试剂盒

3--1,2-（消旋体） 分析标准品（剧品）Human triple-helical peptide,THP ELISA Kit  人螺旋肽兔谷胱甘肽S转移酶α5(GSTα5)酶联吸附测定试剂盒

4--7-硝-2,1,3-并氧杂恶二唑 98%Human human lysosomal-associated membrane protein 2,HLAMP-2 ELISA Kit  人溶酶体相关膜蛋白2兔中性粒碱性酶(NAP)酶联吸附测定试剂盒

N-(2-乙)乙酰 98%Human Cartilage glycoprotein 39,HC gp-39 ELISA Kit  人软骨糖蛋白39兔单核趋化蛋白2(MCP-2/CCL8)酶联吸附测定试剂盒

2--3,6-二氟苄溴 97%Human Opacity-associated proteins,OPAs ELISA Kit  人不透光相关蛋白兔c-fos 酶联吸附测定试剂盒

2--5(三氟)苄溴 97%Human flagellin ELISA Kit  人鞭毛蛋白兔低分子质量蛋白7/β型蛋白酶体9(LMP7/PSMB9)酶联吸附测定试剂盒

 75%Human Poly Serium Antigen,PHSA ELISA Kit  人多聚血清蛋白兔血管紧张素原(AGT)酶联吸附测定试剂盒

5--2-氧 97%Human cytoplasmic immunoglobulin,CIg ELISA Kit  人胞浆球蛋白兔DNA结合蛋白(DBP)酶联吸附测定试剂盒

4-邻二 AR,98.0%Human Fibrinogen like peptide 2,fgl2 ELISA Kit  人纤维介素蛋白兔补体因子H(CFH)酶联吸附测定试剂盒

4- 分析标准品Human Ubiquitin,Ub ELISA Kit  人泛素蛋白兔信号素7A(SEMA7A)酶联吸附测定试剂盒

4- 99.0%Human orosomucoid,ORM ELISA Kit  人类粘蛋白兔凋亡诱导因子(AIF)酶联吸附测定试剂盒

1--6-己烷 98+%Human Elastin,ELN ELISA Kit  人弹性蛋白兔肟前列腺素D2(PGD2-MOX)酶联吸附测定试剂盒

2-环戊酮 97%Human Involucrin,iNV ELISA Kit  人套膜蛋白兔β-微管蛋白(TUBβ)酶联吸附测定试剂盒

1-(4-)哌盐盐 95%Human tenascin-R,TN-R ELISA Kit  人肌腱蛋白R兔大脑糖原化酶(PYGB)酶联吸附测定试剂盒

3--4-氟苄 97%Human growth-associated protein 43,GAP-43 ELISA Kit  人生长相关蛋白43兔脂转运蛋白(PLTP)酶联吸附测定试剂盒
SK-HEP-1细胞纤维蛋白原βElisa试剂盒PE标记的兔抗猴IgGNCX1/SLC8A1  钠钙交换蛋白1抗体

CD86分子Elisa试剂盒PE-Cy3标记的兔抗猴IgGNCoR2  核受体辅助抑制因子2抗体

PSTAT6Elisa试剂盒PE-CY5标记的兔抗猴IgGNCoR1  核受体辅助抑制因子1抗体

PASTAT1Elisa试剂盒APC标记的兔抗猴IgGNCOA3/KAT13B/AIB1/SRC-3  类固受体激活蛋白3抗体

小泛素相关修饰蛋白2Elisa试剂盒Alexa Fluor 350标记的兔抗猴IgGNCOA2  类固受体激活蛋白2抗体

核仁蛋白Elisa试剂盒Alexa Fluor 488标记的兔抗猴IgGNCKAP1  膜相关的蛋白质HEM2抗体

血清素Elisa试剂盒Alexa Fluor 555标记的兔抗猴IgGNCK2/Nck beta  NCK衔接蛋白2抗体

神经丝氨蛋白轻链Elisa试剂盒PE-Cy5.5标记的兔抗猴IgMNck1/NCK alpha  NCK衔接蛋白1抗体

血吸虫IgM抗体Elisa试剂盒PE-Cy7标记的兔抗猴IgMNCF1  嗜中性粒胞浆因子1抗体