
冷冻保存细胞之方法?
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
产品名称 |
RSC95细胞 |
规格 |
详见说明书 |
货号 |
FS-016426 |
细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器备。
培养操作:
1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取.
公司优势:
1.具有多年的销售经验的行业背景,我司秉承质量优先的理念,希望广大科研工作者与我司达成长期的合作关系;
2.公司不仅与各大高校、科研机构以及**性企业有着合作关系,还与国际接轨,我司代理多种知名的国际品牌,如ATCC、DSMZ、Millipore、Abcam,Serva、Pharmacia、eBioscience,Santa,Abnova,GenWay等。
相关热销产品:
胱抑素A(CSTA/STF1/STFA)ELISA试剂盒2,6-二氟苯甲酰 97%钠 CP芦丁/芸香叶苷(标准品)
胱天蛋白酶激活的脱氧核糖核酸酶(CAD)ELISA试剂盒诺氟沙星 98%钠 ACS,99.0-101.0% 新橙皮苷二氢查尔酮
胱天蛋白酶9(Caspase-9)ELISA试剂盒氟化,无水 AR,粉末氯铂酸铵 AR新橙皮苷二氢查尔酮(标准品)
胱天蛋白酶9(Casp-9)ELISA试剂盒氟化,无水 GR,粉末氯亚铂酸铵 铂含量:52.0%氧化苦参碱
胱天蛋白酶8(Caspase-8)ELISA试剂盒氟化,无水 SP氯亚钯酸铵 Pd ≥36.5%氧化苦参碱(标准品)
胱天蛋白酶8(Casp-8)ELISA试剂盒氟化,无水 99.9% metals basis氯铱酸铵 铱含量:43.0%穿心莲内酯
胱天蛋白酶-5(CASP5)ELISA试剂盒氟化,无水 AR,颗粒氧化金 金含量≥88.6 %穿心莲内酯(标准品)
胱天蛋白酶3(Caspase-3)ELISA试剂盒氟化,无水 电子级,粉末反式-双(三苯基膦)合氯化羰基铑(Ⅰ) Rh 14.91%芹菜素
胱天蛋白酶3(Casp-3)ELISA试剂盒13-乙酰基-9-羟基巴卡丁III 分析标准品,≥99%双(苯)二氯铂(II) Pt ≥41.0%芹菜素(标准品)
胱天蛋白酶12(Casp-12)ELISA试剂盒13-乙酰基-9-羟基巴卡丁III 99%二氯二氨钯 Pd ≥50% 齐墩果酸
胱天蛋白酶10(CASP10)ELISA试剂盒10-脱乙酰基巴卡丁 III 95%氯铱酸 Ir 35% in HCl齐墩果酸(高纯98%)
胱天蛋白酶1(Casp-1)ELISA试剂盒7-乙基-10-羟基喜树碱 98%二氧化铱 Ir 86%齐墩果酸(标准品)
胱硫β-合酶(CBS)ELISA试剂盒鬼臼素 98%铱粉 99.99% metals basis莽草酸
胍基丁脲水解酶/凝集酶(AGMAT)ELISA试剂盒紫杉 分析标准品,≥98% 铱粉 99.9% metals basis莽草酸(标准品)
骨织素(Ostn)ELISA试剂盒紫杉 98%三氯化铱 试剂级,Ir>52%羊藿苷
骨粘连蛋白(ON)ELISA试剂盒乙酸甲脒 99%四氯化铱(IV) 水合物 Ir 48.0 - 55.0 %羊藿苷(标准品)
RSC95细胞O1群霍乱弧菌
种属: Vibrio│cholerae O1
提供形式: 冻干物
**等级: 3
模式菌株: no
应用领域: O1/classical 稻叶(Inaba)
培养基: CM0116
生长条件: 37℃
大杯蕈
种属: Clitocybe│maxima
提供形式: 斜面培养物
**等级: 1
模式菌株: no
应用领域: 用于科研教学。
培养基: 0014
生长条件: 25℃