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荧光定量PCR扩增曲线介绍
日期：2025-05-01 09:03
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摘要：
扩增曲线是描述PCR动态进程的曲线，以循环数为横坐标，以反应过程中实时荧光信号强度为纵坐标。
理论上PCR过程中反应产物是以指数增长的，但随着PCR循环数的增加，DNA聚合酶失活、dNTP和引物枯竭、反应副产物阻碍反应等原因，致使PCR的扩增效率降低，产物**的速度逐渐减缓，因此扩增曲线是一条“S形”曲线。
扩增曲线可以分成四个时期：基线期，指数期，线性期，平台期。
基线期：扩增曲线的水平部分，扩增的荧光信号被荧光背景信号所掩盖，无法判断产物**量的变化。
指数期：PCR指数扩增期，扩增曲线起峰，每个循环的产...
扩增曲线是描述PCR动态进程的曲线，以循环数为横坐标，以反应过程中实时荧光信号强度为纵坐标。
理论上PCR过程中反应产物是以指数增长的，但随着PCR循环数的增加，DNA聚合酶失活、dNTP和引物枯竭、反应副产物阻碍反应等原因，致使PCR的扩增效率降低，产物**的速度逐渐减缓，因此扩增曲线是一条“S形”曲线。
扩增曲线可以分成四个时期：基线期，指数期，线性期，平台期。
基线期：扩增曲线的水平部分，扩增的荧光信号被荧光背景信号所掩盖，无法判断产物**量的变化。
指数期：PCR指数扩增期，扩增曲线起峰，每个循环的产物量与初始模板量符合指数关系，PCR产物量的对数值与起始模板量之间存在线性关系。
线性期：PCR反应后期，由于PCR反应体系各成分的消耗、产物抑制等因素的影响，反应效率降低，产物量与初始模板量不再符合指数关系。
平台期：PCR反应停止，PCR产物不再随循环数增加而增加。由于影响PCR扩增的因素错综复杂，每个反应进入平台期的时间和平台期的高低都各不相同。