细胞转染常用步骤

日期:2025-05-02 04:02
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摘要: 常用步骤: 1. 转染试剂的准备 ① 将400ul去核酸酶水加入管中,震荡10秒钟,溶解脂状物。 ② 震荡后将试剂放在-20摄氏度保存,使用前还需震荡。 2. 选择合适的混合比例(1:1-1:2/脂质体 [1]体积:DNA质量)来转染细胞。在一个转染管中加入合适体积的无血清培养基。加入合适质量的MyoD或者EGFP的DNA,震荡后在加入合适体积的转染试剂,再次震荡。 3. 将混合液在室温放置10―15分钟。 4. 吸去培养板中的培养基,用PBS或者无血清培养基清洗一次。 5. 加入混合液,将细胞放回培养箱中培...

常用步骤

1. 转染试剂的准备

① 将400ul去核酸酶水加入管中,震荡10秒钟,溶解脂状物。

② 震荡后将试剂放在-20摄氏度保存,使用前还需震荡。

2. 选择合适的混合比例(1112/脂质体 [1]体积:DNA质量)来转染细胞。在一个转染管中加入合适体积的无血清培养基。加入合适质量的MyoD或者EGFPDNA,震荡后在加入合适体积的转染试剂,再次震荡。

3. 将混合液在室温放置1015分钟。

4. 吸去培养板中的培养基,用PBS或者无血清培养基清洗一次。

5. 加入混合液,将细胞放回培养箱中培养一个小时。

6. 到时后,根据细胞种类决定是否移除混合液,之后加入完全培养基继续培养2448小时。