哪些是qPCR探针设计的一般原则

日期:2025-05-04 03:49
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摘要: 哪些是qPCR探针设计的一般原则: 1、扩增片段的长度不应太大,一般小于300bp。 2、探针不能和任一引物互补,且其长度在保证特异性的前提下尽可能的短,长度不要超过30bp。 3、探针的Tm值至少比引物的Tm值高5度 4、探针如用于检测多态位点,多态位点应尽可能靠近探针中部 5、探针5’端不能是碱基G,G对荧光基团有猝灭作用。

哪些是qPCR探针设计的一般原则:

1、扩增片段的长度不应太大,一般小于300bp。

2、探针不能和任一引物互补,且其长度在保证特异性的前提下尽可能的短,长度不要超过30bp。

3、探针的Tm值至少比引物的Tm值高5度

4、探针如用于检测多态位点,多态位点应尽可能靠近探针中部

5、探针5’端不能是碱基G,G对荧光基团有猝灭作用。