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贴壁细胞传代具体流程
日期：2025-05-04 08:51
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摘要：
贴壁细胞(adherent cells)，这类细胞的生长必须有可以贴附的支持物表面，细胞依靠自身分泌的或培养基中提供的贴附因子才能在该表面上生长，繁殖。贴壁细胞传代（以一个T25瓶为例）具体流程：
1、 吸出原培养液；
2、 加入2ml左右PBS，轻轻晃动培养瓶润洗细胞，吸出PBS丢弃；
3、 加入1ml左右胰酶，轻轻晃动培养瓶使之浸润所有细胞，放入培养箱消化；
4、 消化时间跟据细胞特性有所不同，显微镜下看到细胞块中间的细胞明显分离...
贴壁细胞(adherent cells)，这类细胞的生长必须有可以贴附的支持物表面，细胞依靠自身分泌的或培养基中提供的贴附因子才能在该表面上生长，繁殖。贴壁细胞传代（以一个T25瓶为例）具体流程：
1、 吸出原培养液；
2、 加入2ml左右PBS，轻轻晃动培养瓶润洗细胞，吸出PBS丢弃；
3、 加入1ml左右胰酶，轻轻晃动培养瓶使之浸润所有细胞，放入培养箱消化；
4、 消化时间跟据细胞特性有所不同，显微镜下看到细胞块中间的细胞明显分离变圆，侧立培养瓶细胞可以滑落时可终止消化，全程不要拍打培养瓶；
5、 加入3ml含血清的培养基终止消化，吹打细胞使之脱落并在液体里反复吹打使细胞，使之尽量呈单颗细胞的悬浮液，这时可以在显微镜看下；
6、 收集细胞悬液离心，1200rpm（约250g） 3分钟，离心完吸出上清丢弃。
7、 加入新鲜培养基，吹打几下混匀细胞即可，按需接种到新培养瓶，补足培养基，拧松瓶盖或使用透气瓶盖进行培养。
8、 检查培养箱二氧化碳，温度和水盘。