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RNA提取注意事项
日期：2025-05-04 07:13
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摘要：RNA提取注意事项
RNA提取注意事项
1、组织样本要尽可能的新鲜，避免反复冻融。
2、提取时组织要充分研磨，组织量不宜过少，更不宜过多。
3、加入裂解液后应给予充分的孵育时间，使样本充分裂解。
4、在用Trizol法提取时，分层后吸取上清的原则是“宁愿少吸，不能多吸”，千万不能提取到中间层，否则会导致严重的基因组DNA污染。
5、洗涤时洗涤液应充分浸润到管壁的四周，确保洗涤彻底。
6、柱式提取法，洗涤完后除了对柱子进行空离后，还应当将吸附柱置于超净台内吹风5~10 min，使有机溶剂充分挥发干。
7、柱式法*后洗脱时候，当加入DEPC水后还应孵育3~5 min，或者提前将DEPC水加热至60℃，可提高洗脱得率。传统的Trizol裂解异丙醇沉淀法*后RNA是用DEPC水溶解沉淀，则应当给予适当溶解时间，并用枪头不断吹吸离心管底部。