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细胞简介：
兔牙周膜成纤维细胞分离自牙周膜组织；牙周膜（牙周韧带、牙周间隙）是由致密结缔组织所构成。多数纤维排列成束，纤维的一端埋于牙骨质内，另一端则埋于牙槽窝骨壁里，使牙齿固位于牙槽窝内；牙周膜内有神经、血管、和上皮细胞等。成纤维细胞（Fibroblast）是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的牙周膜成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁完全，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。牙周膜成纤维细胞（PLFs）作为牙周膜的主体细胞，是牙周膜主要的间质细胞，它不仅具有合成胶原、基质、弹力纤维和糖蛋白的功能，还有吸收胶原吞噬异物的能力，还参与了牙周组织的病变、修复及再生过程。现在，利用牙周膜细胞建立体外模型，已经成为有关员研究牙周组织的重要手段。
商品属性：
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产品名称 |
种属 |
兔 |
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组织来源 |
牙周膜 |
规格 |
5×10⁵Cells/T25培养瓶 |
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货号 |
A01X2225 |
细胞形态 |
成纤维细胞样 |
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培养条件 |
气相：空气，95%；CO2，5% |
生长特性 |
贴壁 |
方法简介：
实验室分离的兔牙周膜成纤维细胞采用胶原酶-胰蛋白酶联合消化法制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测
实验室分离的兔牙周膜成纤维细胞经Vimentin荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
培养信息：
培养基：含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率：每2-3天换液一次
生长特性：贴壁
细胞形态：成纤维细胞样
传代特性：可传5代左右；3代以内状态佳
消化液：0.25%胰蛋白酶
培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%
兔牙周膜成纤维细胞体外培养周期有限；建议使用配套的生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态。
原代细胞的培养条件：
① 静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
a 细胞要通过充分漂洗，以尽量除去消化液的毒性
b 细胞接种时浓度要稍大一些，至少为5×108细胞/L。
c 培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养。
d 胎牛血清浓度为10%-80%。
e 应在37℃5% CO2的培养箱中培养。。
f 在起始的2天中尽量减少振荡，以防止刚贴壁的细胞发生脱落，漂浮。
g 待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状，应将原代细胞换液
h 用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时，应将细胞悬液经低速离心后换液。
② 悬浮细胞的培养要求
a 原代培养时要尽量去除红细胞
b 短期培养，可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行
c 细胞浓度可在5-8×109/L范围内，进行分瓶试验。
d 长期培养时，细胞中要加入生长因子，白血病细胞中要加入少量的原患者血清，以利细胞生长。
f 细胞换液一般每隔3天需半量换液一次
g 细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。
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