
(1)原代细胞的培养方法
原代细胞的培养也叫初代培养是从供体取得组织细胞在体外进行的培养,是建立细胞系的步,是一项基本技术。原代细胞接近和能反映体内生长特性,适宜用于敏感性试验、细胞分化等实验研究。
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
商品属性:
组织来源 |
胎盘 |
规格 |
5×10⁵Cells/T25培养瓶 |
细胞分类 |
兔原代细胞 |
培养条件 |
气相:空气,95%;CO2,5% |
生长特性 |
贴壁 |
细胞形态 |
梭形、多角形 |
细胞简介:

兔胎盘绒毛膜滋养层细胞分离自胎盘组织;胎盘(placenta)是哺乳动物妊娠期间由胚胎的胚膜和母体内膜联合长成的母子间交换物质的过渡性器官,由羊膜、叶状绒毛膜和底蜕膜构成。胎儿在中发育,依靠胎盘从母体取得营养,而双方保持相当的独立性。胎盘还产生多种维持妊娠的,是一个重要的器官。有些爬行类和鱼类也以胎生方式繁殖后代,胚胎生长出一些辅助结构如卵黄囊、鳃丝等与母体组织紧密结合,以达到母子间物质的交换,这样的结构称假胎盘。绒毛膜是由滋养层和胚外中胚层的壁层构成。胚泡植入内膜后,在胚泡表面形成许多绒毛样的突起,以细胞滋养层为中轴,外裹合体滋养层,称初级干绒毛。胚外中胚层长入初级干绒毛的中轴,使初级干绒毛变成了次级干绒毛。当绒毛膜的胚外中胚层内形成血管网和结缔组织,并与胚体内的血管相通时,次级干绒毛改称三级干绒毛。三级干绒毛末端的细胞滋养层细胞形成细胞滋养层壳。随着胚胎发育,丛密绒毛膜与基蜕膜共同构成了胎盘,而平滑绒毛膜则和包蜕膜一起逐渐与壁蜕膜融合。
方法简介:
实验室分离的兔胎盘绒毛膜滋养层细胞采用胰蛋白酶-DNA酶联合消化法结合密度梯度离心法制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测
实验室分离的兔胎盘绒毛膜滋养层细胞经Cytokeratin-7荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
培养信息:
包被条件:PLL(0.1mg/ml)
培养基:含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:梭形、多角形
传代特性:可传1-2代
消化液:0.25%胰蛋白酶
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%
兔胎盘绒毛膜滋养层细胞体外培养周期有限;建议使用配套的生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的佳培养状态。
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CROC4抗体
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磷酸化外纺锤体极样蛋白1抗体 Anti-phospho-Separase (Ser1073)
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核仁蛋白8抗体 Anti-NOL8
锌指蛋白185抗体 Anti-ZNF185
氨基丁酸转运蛋白VGAT抗体
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LYSMD4蛋白抗体
LYSMD4
磷酸肌醇磷酸酶蛋白INPP5G抗体 Anti-Synaptojanin/INPP5G
丙酮酸脱氢酶激酶亚型2抗体 Anti-PDK2
配对盒基因3抗体 Anti-PAX3
转录因子7类似物2抗体 Anti-TCF7L2
辣根过氧化物酶抗体
兔胎盘绒毛膜滋养层细胞脂肪分解刺激脂蛋白受体抗体
LSR/Lipolysis Stimulated Lipoprotein Receptor
B细胞迁移基因4抗体
BTG4
原代细胞的分离方法:
一、悬浮细胞的分离方法
组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料,简单的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层,这样可根据需要收获目的细胞。二、实体组织材料的分离方法
对于实体组织材料,由于细胞间结合紧密,为了使组织中的细胞充分分散,形成细胞悬液,可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。
(一)机械分散法
特点:简便、快速,但对组织机械损伤大,而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。
(二)消化分离法
组织消化法是把组织剪切成较小团块(或糊状),应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动,使团块膨松,由块状变成絮状,此时再采用机械法,用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡,使细胞团块得以较充分的分散,制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液,接种培养后,细胞容易贴壁生长。