(1)原代细胞的培养方法
原代细胞的培养也叫初代培养是从供体取得组织细胞在体外进行的培养，是建立细胞系的步，是一项基本技术。原代细胞接近和能反映体内生长特性，适宜用于敏感性试验、细胞分化等实验研究。
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养，或经细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。
商品属性：
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组织来源 |
眼角膜组织 |
规格 |
5×10⁵Cells/T25培养瓶 |
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细胞分类 |
兔原代细胞 |
培养条件 |
气相：空气，95%；CO2，5% |
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生长特性 |
贴壁 |
细胞形态 |
内皮细胞样 |
细胞简介：
兔角膜内皮细胞分离自眼角膜组织；角膜位于眼球前壁的一层透明膜，约占纤维膜的前1/6，从后面看角膜呈正圆形，从前面看为横椭圆形。角膜厚度各部分不尽相同，中央部薄。角膜有十分敏感的神经末梢，如有外物接触角膜，眼睑便会不由自主地合上以保护眼睛。为了保持透明，角膜并没有血管，透过外界空气、泪液及房水获取养份及氧气。角膜分为五层，由前向后依次为：上皮细胞层、前弹力层、基质层、后弹力层、内皮细胞层。角膜的高度透明性和光学性是正常发挥生理功能的必要条件之一，而角膜内皮细胞（CEC）在维持角膜的正常生理功能方面起重要作用。角膜内皮细胞是角膜内层的单层细胞，构成了后弹力层和房水之间的物理屏障，通过离子“泵”功能调节角膜中离子浓度和水分，维持角膜的半脱水状态，保证角膜的正常厚度和透明度。一旦角膜内皮细胞功能出现紊乱，常导致角膜水肿而使角膜部分甚至完全失去透明性。角膜内皮细胞主要功能有：①角膜是的无血管的组织，具有透明的特性和合成许多蛋白的功能；②角膜内皮细胞对角膜透明性有重要作用；③角膜内皮细胞通过Na+-K+-ATP酶活性，维持角膜和房水内Na+梯度，防止水分渗入角膜内，维持角膜实质层相对脱水状态，维持透明性。
方法简介：
公司实验室分离的兔角膜内皮细胞采用混合胶原酶消化结合内皮细胞培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测
公司实验室分离的兔角膜内皮细胞经NSE（神经元特异性烯醇化酶）荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
培养信息：
包被条件 PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%）
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 内皮细胞样
传代特性 可传2-3代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
公司正在出售的产品：
大鼠II型角蛋白,细胞骨架71(KRT71)elisa检测试剂盒
EGF蛋白样3抗体
MEGF6/EGFL3
DMXL2蛋白抗体
DMXL2
小鼠肺炎支原体(MP)抗体(IgG)elisa检测试剂盒
大鼠αL岩藻糖苷酶(AFU)elisa检测试剂盒
体液谷丙酮酸转氨酶（GPT）活性光谱法定量检测试剂盒
人NOD样受体(NLR)elisa检测试剂盒
HMX3蛋白抗体
PELP1
源盒蛋白B8抗体
HOXB8
调节染色体组装激酶1抗体 Anti-TLK1
调亡诱导因子6相互作用蛋白/多巴胺受体相互作用蛋白4抗体 Anti-PDC6I/Alix
蛋白激酶9抗体 Anti-PTK9/TWF1
丝氨酸蛋白酶抑制剂B12抗体 Anti-SERPINB12
罗丹明标记的兔抗人IgG H&L
Rabbit Anti-Human IgG H&L / RBITC
磷酸化肝癌缺失基因1抗体
phospho-DLC1 (Ser567)
锌指/环指蛋白4抗体 Anti-ZNRF4
磷酸化中心粒蛋白Nudel抗体 Anti-phospho-NDEL1(Ser242)
磷酸化Rad51抗体 Anti-phospho-RAD51(Tyr315)
维甲酸诱导蛋白6抗体 Anti-STRA6
大鼠Ⅲ型前胶原(HPCⅢ)elisa分析检测试剂盒
兔角膜内皮细胞Fas相互作用蛋白激酶3抗体
HIPK3
拟南芥ACA11抗体
ACA11
原代细胞的分离方法：
一、悬浮细胞的分离方法
组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料，简单的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞。二、实体组织材料的分离方法
对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液，可采用机械分散法（物理裂解）和消化分离法。
（一）机械分散法
特点:简便、快速,但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。
（二）消化分离法
组织消化法是把组织剪切成较小团块（或糊状），应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松，由块状变成絮状，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液，接种培养后，细胞容易贴壁生长。