(1)原代细胞的培养方法
原代细胞的培养也叫初代培养是从供体取得组织细胞在体外进行的培养，是建立细胞系的步，是一项基本技术。原代细胞接近和能反映体内生长特性，适宜用于敏感性试验、细胞分化等实验研究。
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养，或经细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。
商品属性：
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组织来源 |
椎间盘组织 |
规格 |
5×10⁵Cells/T25培养瓶 |
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细胞分类 |
人原代细胞 |
培养条件 |
气相：空气，95%；CO2，5% |
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生长特性 |
贴壁 |
细胞形态 |
梭形、多角形 |
细胞简介：
人椎间盘纤维环细胞分离自椎间盘组织；椎间盘是位于脊柱两椎体之间，由软骨板、纤维环、髓核组成的一个密封体。上下有软骨板，是透明软骨复盖于椎体上，下面骺环中间的骨面。上下的软骨板与纤维环一起将髓核密封起来。纤维环由胶原纤维束的纤维软骨构成，位于髓核的四周。纤维环的纤维束相互斜行交叉重叠，使纤维环成为坚实的组织，能承受较大的弯曲和扭转负荷。纤维环的前侧及两侧较厚，而后侧较薄。纤维环的前部有强大的前纵韧带，后侧的后纵韧带较窄、较薄。纤维环细胞密度为9000个细胞/mm3，其外层的细胞呈梭型，主要属于纤维细胞，内层细胞呈圆形，主要属于软骨细胞。在培养的情况下，用透射电镜观察则有许多共同的超微结构表现，它们的核较圆，核仁较明显。细胞质内可见大量的附有核糖体颗粒的粗面内质网和滑面内质网。细胞质内线粒体多，为椭圆形，有的可看到双层单位膜，由单位膜包绕初级深酶体和次级深酶体。细胞质内有一系列的扁平囊及小泡主成的高尔基复合体和分泌颗粒，纤维环细胞合成分泌蛋白多糖及胶原纤维的能力很旺盛，保证纤维环生理代谢活动所需的构造物质的供给。一但这种供给减少，纤维环的生物性能就会减弱，椎间盘开始退变。
方法简介：
公司实验室分离的人椎间盘纤维环细胞采用胶原酶-中性蛋白酶联合消化法并结合软骨细胞培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测
公司实验室分离的人椎间盘纤维环细胞经Ⅰ型胶原蛋白荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
培养信息：
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 梭形、多角形
传代特性 可传5代左右；3代以内状态佳
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
公司正在出售的产品：
BMP-9ELISAKit
仓鼠前列腺素E2(PGE2)elisa分析检测试剂盒
PGE2 ELISA Kit
人毒蕈碱型乙酰胆碱受体M2(mAChRM2)自身抗体elisa分析检测试剂盒
HumanmuscarinicacetylcholinereceptorM2(mAChRM2)autoantibodyELISAkit
小鼠白介素27(IL27)elisa检测试剂盒
大鼠1,25二羟基维生素D3(1,25 DHVD3)elisa检测试剂盒
钙钠交换体（NCX）蛋白表达ELISA定量检测试剂盒
犬I 型胶原蛋白elisa检测试剂盒
INTS1蛋白抗体
INTS1
炭疽杆菌致死因子LF抗体
Anthrax lethal factor
（AMYLASE）定性检测试剂盒
兔γ-谷氨酰转移酶1(GGT1)elisa检测试剂盒
大鼠尿调蛋白(UMOD)elisa检测试剂盒
细胞凋亡诱导（DNA合成抑制）试剂盒
多通道膜蛋白PTCHD2抗体
PTCHD2
癌胚抗原相关细胞粘附分子16抗体
CEACAM16
泛素蛋白连接酶2N抗体 Anti-Ube2N/UBC13
原钙粘蛋白γB1抗体 Anti-PCDHGB1
细胞膜调控蛋白Paralemmin 1抗体 Anti-Paralemmin 1
粘结蛋白SA1抗体 Anti-SA1/Nuclear protein stromal antigen 1
碱性磷酸酶（AP）标记的羊抗鸡IgG H&L
人椎间盘纤维环细胞大鼠单核细胞趋化蛋白3(MCP3)elisa检测试剂盒
小鼠嗜环蛋白/亲环素A(CyPA)elisa检测试剂盒
人REST协阻抑因子3(RCOR3)elisa分析检测试剂盒
组织EPHB4激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C）
原代细胞的分离方法：
一、悬浮细胞的分离方法
组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料，简单的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞。二、实体组织材料的分离方法
对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液，可采用机械分散法（物理裂解）和消化分离法。
（一）机械分散法
特点:简便、快速,但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。
（二）消化分离法
组织消化法是把组织剪切成较小团块（或糊状），应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松，由块状变成絮状，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液，接种培养后，细胞容易贴壁生长。