
商品属性:
货号 |
规格 |
产品名称 |
A-Hc2227-20 μl |
20 μl |
pET-28a(+) Seamless Cloning Kit(线性化质粒) |
产品介绍:
pET-28a(+) Seamless Cloning Kit(线性化质粒)pET-28a(+)载体为高水平的原核表达载体,在N端含有His-Tag, Thrombin(凝血酶)酶切位点,T7-Tag,在C端具有His-Tag。本产品提供pET-28a(+)经EcoRⅠ酶切后的线性化载体,可用无缝克隆技术将单个或多个DNA片段组装到载体上。
产品特点:
1. pET-28a载体为原核表达载体,具有N-His, N-Thrombin, N-T7和C-His。
操作步骤:
1. pET-28a(+)线性化载体使用方法:
公司正在出售的产品:
无缝克隆技术可在重组酶的作用下,只需一步反应,便可将片段克隆到任何载体中的任意位置,得到重组质粒。无缝克隆技术作为一种非常强大的克隆技术,具有快速、简便、高效、多片段组装和定向克隆等特点,用于单个 DNA 片段的克隆,多个 DNA 片段组装克隆以及多位点突变构建等实验目的。
2. pET-28a经EcoRⅠ酶切后的线性化载体,省时省力。
3. 无缝克隆技术只需要简单的 PCR 扩增就可以制备片段DNA。
4. 可以克隆长片段和多片段DNA。
5. 简单、快速、定向克隆。
(1) pET-28a(+)线性化载体当做克隆载体使用,可以在扩增PCR产物的
上游引物 5’端添加序列:GCCTGGTGCCGCGCGGCAGCCATATG(需要5’端HIS标签时)
或者AACTTTAAGAAGGAGATATACCATG(不需要5’端HIS标签时)
下游引物 5’端添加序列:CTCAGTGGTGGTGGTGGTGGTGCTCGAG(需要3’端HIS标签时)
或者CTCAGTGGTGGTGGTGGTGGTGCTCGAGTCA(不需要3’端HIS标签时)
通过无缝克隆连接到pET-28a(+)中。
(1) 测序引物
T7: 5'-TAATACGACTCACTATAGGG-3'
T7t: 5'-GCTAGTTATTGCTCAGCGG-3'
-2
pET-28a(+)线性化载体为 EcoRⅠ酶切后的线性化载体,图谱及多克隆位点
干斑DNA提取试剂盒 |
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