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  • 产品名称:pcDNA3.1(+) Seamless Cloning Kit(线性化质粒)

  • 产品型号:A-Hc2225
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简单介绍:
pcDNA3.1(+) Seamless Cloning Kit(线性化质粒)公司正在出售的产品:GST Magnetic BeadspBM16A Toposmart Cloning Kit(T载体 TOPO克隆载体)T4 DNA Polymerase (exo-)极高热稳定单链结合蛋白去内**中大量质粒富集提取试剂盒
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产品名称

A-Hc2225-20 μl

20 μl

pcDNA3.1(+) Seamless Cloning Kit(线性化质粒)

产品介绍:


pcDNA3.1(+) Seamless Cloning Kit(线性化质粒)pcDNA3.1(+)载体为哺乳动物细胞表达载体,具有人巨细胞病毒(CMV)启动子,在哺乳动物细胞中高水平表达;新霉素抗性基因,用于选择稳定细胞系。本产品提供pcDNA3.1(+)经EcoRⅠ酶切后的线性化载体,可用无缝克隆技术将单个或多个DNA片段组装到载体上。
无缝克隆技术可在重组酶的作用下,只需一步反应,便可将片段克隆到任何载体中的任意位置,得到重组质粒。无缝克隆技术作为一种非常强大的克隆技术,具有快速、简便、高效、多片段组装和定向克隆等特点,用于单个 DNA 片段的克隆,多个 DNA 片段组装克隆以及多位点突变构建等实验目的。

 

产品特点:


1. pcDNA3.1(+)具有人巨细胞病毒(CMV)启动子,在哺乳动物细胞中高水平表达。
2. pcDNA3.1(+)具有新霉素抗性基因,用于选择稳定细胞系。
3. pcDNA3.1(+)经EcoRⅠ酶切后的线性化载体,省时省力。
4. 无缝克隆技术只需要简单的 PCR 扩增就可以制备片段DNA。
5. 可以克隆长片段和多片段DNA。

操作步骤:


1. pcDNA3.1(+)线性化载体使用方法:
(1) pcDNA3.1(+)线性化载体当做克隆载体使用,可以在扩增PCR产物的
上游引物 5’端添加序列:TAGGGAGACCCAAGCTGGCTAGCgccacc(gccacc为Kozak序列)
下游引物 5’端添加序列:CACTGTGCTGGATATCTGCAGAATTC
通过无缝克隆连接到pcDNA3.1(+)中。
(2) 测序引物
pcDNA3.1-F:CTAGAGAACCCACTGCTTAC
pcDNA3.1-R(BGH-R):TAGAAGGCACAGTCGAGG
(3) pcDNA3.1(+)线性化载体为 EcoRⅠ酶切后的线性化载体,图谱及多克隆位点

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