
公司细胞现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
产品名称
规格
货号
KLE细胞
T25
FS-X3496
形态特性:上皮样
生长特性:贴壁生长
特征特性:该细胞源自64岁内膜癌女性患者
培养条件:DMEM(高糖)+10%FBS
传代方法:1:3传代,CQ-4天换液一次
1. 50ml 配制好的RPMI1640培养液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml烧杯2个;
4、培养皿1个,细胞培养瓶1个
5、1ml ,200μl移液器各1支;枪头盒2个;无菌玻璃搅拌棒1个
6、细胞计数板1块;
7、灭好菌的镊子1把,剪刀1把;
8、酒精灯1台;
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
冻存培养基:
冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。
1)细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基,其所含胎牛血清和牛血清比例经过优,可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。
2)冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基,含10% DMSO,适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。
培养细胞冻存方案:
以下实验方案介绍了培养细胞冻存的一般流程。详细的实验方案,必须参阅针对具体细胞的产品说明书。
1.配制冻存培养基,于2°C至8°C下储存,直至使用。请注意使用何种冻存培养基取决于所用细胞系。
2.冻存贴壁细胞时,利用传代时所用方法轻柔地使细胞从组织培养容器上脱离下来。用该细胞所需完全培养基重新悬浮细胞。
3.采用血球计数器、细胞计数仪按照台盼蓝拒染法或者使用自动细胞计数仪测定总细胞数和活细胞百分比。根据所需活细胞密度,计算冻存培养基需要量。
4.以大约100-200×g的离心力将细胞悬液离心5至10分钟。在无菌条件下小心倒掉上清液,不要搅动细胞沉淀。
注:离心速度和时间取决于细胞种类。
5.用预冷的冻存培养基重新悬浮细胞沉淀,将其调整至该细胞适合的活细胞密度。
6.将细胞悬液分装到若干冻存管中。分装时,应不时轻轻混合细胞,使其保持均匀的细胞悬液状态。
7.使用可控制降温速度的冷冻装置冷冻细胞,使温度每分钟大约降低1°C。或者,将装有细胞的冻存管放入冻存盒中,然后将冻存盒置于-80°C条件下过夜。
Anti-phospho C-Myc(pThr58/pSer62)/FITC 荧光素标记抗化致癌因C-Myc抗体IgG绵羊Smad同源物1 (Smad1/MADH1)酶联吸附测定试剂盒
Anti-phospho C-Met/pHGFR(pTyr1365)/FITC 荧光素标记抗化原癌因c-Met抗体IgG绵羊胞浆蛋白1(STMN1)酶联吸附测定试剂盒
Anti-phospho-c-Jun/AP-1(pThr91/pThr93)/FITC 荧光素标记抗化原癌因c-Jun抗体IgG绵羊表面膜球蛋白D(mIgD)酶联吸附测定试剂盒
Anti-phospho-c-Jun (Ser243) /FITC 荧光素标记化原癌因c-Jun抗体IgG绵羊胸腺依赖性抗原(TD-Ag)酶联吸附测定试剂盒
Anti-phospho-c-Jun (Thr93) /FITC 荧光素标记化原癌因c-Jun抗体IgG绵羊白介素8(IL-8)酶联吸附测定试剂盒
Anti-phospho-c-Jun (Ser63) /FITC 荧光素标记化原癌因c-Jun抗体IgG绵羊白分化抗原CD40配体(CD40L/TNFSF5)酶联吸附测定试剂盒
Anti-phospho-MEK1/MAPKK1(pSer298)/FITC 荧光素标记抗化丝裂原活化蛋白激酶激酶1抗体IgG绵羊嗜性白血球相关之RNA水解酵素家族成员1(EAR1)酶联吸附测定试剂盒
Anti-phospho Histone H1,4(pSer27)/FITC 荧光素标记抗化组蛋白H1,4样蛋白抗体IgG绵羊血管紧张素II (ANG II)酶联吸附测定试剂盒
Anti-phospho c-kit/SCFR/CD117(pTyr936)FITC 荧光素标记抗化原癌因c-kit抗体IgG绵羊去唾液糖蛋白受体2(ASGR2)酶联吸附测定试剂盒
Anti-Phospho-c-Kit (Tyr703) /FITC 荧光素标记化原癌因c-kit抗体IgG绵羊粘蛋白21(MUC21)酶联吸附测定试剂盒
Anti-Phospho-c-Kit (Tyr719) /FITC 荧光素标记化原癌因c-kit抗体IgG绵羊成纤维生长因子受体4(FGFR4)酶联吸附测定试剂盒
Anti-Phospho-FAK (Tyr397) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠化粘着斑激酶抗体IgG绵羊肌球蛋白重链10(MYH10)酶联吸附测定试剂盒
Anti-P-HP1/FITC 荧光素标记抗异染色质蛋白1化抗体(果蝇)IgG绵羊球蛋白A Fc段受体(FcαR/CD89)酶联吸附测定试剂盒
Anti-P-HP1/FITC 荧光素标记抗异染色质蛋白1化抗体(果蝇)IgG绵羊粘膜相关上皮趋化因子(MEC/CCL28)酶联吸附测定试剂盒
Anti-Phospho-HP1 gamma (Ser83) /FITC 荧光素标记化染色质相关蛋白1-γ抗体IgG绵羊谷胱甘肽S转移酶θ2(GSTθ2/GSTt2)酶联吸附测定试剂盒
CD8分子Elisa试剂盒人胸肾表达趋化因子GLT8D1 糖转移酶8结构域1抗体
脂肪因子Elisa试剂盒人B-趋化因子GLT8D1 糖转移酶8结构域1抗体
c-Jun氨末端激酶Elisa试剂盒小鼠脂酰丝氨GLP2R 胰高血糖素样肽2受体抗体
CX3C趋化因子;fractalkineElisa试剂盒兔子转化生长因子βGLP-2 胰高血糖素样肽-2抗体
CX3C趋化因子受体1Elisa试剂盒鱼促肾上腺皮质GLP-2 胰高血糖素样肽-2抗体
CXC趋化因子配体1Elisa试剂盒大鼠可溶性凋亡相关因子GLP-1R 胰高血糖素样肽-1受体抗体
CXC趋化因子受体4Elisa试剂盒人膜粘连蛋白 Ⅱ ELISA 试剂盒GLP-1(1G9) GLP-1单克隆抗体
C-反应蛋白Elisa试剂盒小鼠胆碱甘油酯GLP-1 (7-36) 胰高血糖素样肽-1抗体
实验材料:
3、50ml离心筒2个
KLE细胞CD68分子Elisa试剂盒小鼠抗单链DNA抗体/变性DNA抗体GLT8D2 糖转移酶GLT8D2抗体