产品名称：A2780/Taxo1细胞

产品名称：卵巢癌紫衫醇耐药株
形态特性：上皮样

生长特性：贴壁生长

培养条件：RPMI-1640

传代方法：1：2传代

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冻存培养基：

冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。

1）细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基，其所含胎牛血清和牛血清比例经过优，可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。 

2）冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基，含10% DMSO，适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。

培养细胞冻存方案：

以下实验方案介绍了培养细胞冻存的一般流程。详细的实验方案，必须参阅针对具体细胞的产品说明书。 

1.配制冻存培养基，于2°C至8°C下储存，直至使用。请注意使用何种冻存培养基取决于所用细胞系。

2.冻存贴壁细胞时，利用传代时所用方法轻柔地使细胞从组织培养容器上脱离下来。用该细胞所需完全培养基重新悬浮细胞。

3.采用血球计数器、细胞计数仪按照台盼蓝拒染法或者使用自动细胞计数仪测定总细胞数和活细胞百分比。根据所需活细胞密度，计算冻存培养基需要量。

4.以大约100-200×g的离心力将细胞悬液离心5至10分钟。在无菌条件下小心倒掉上清液，不要搅动细胞沉淀。

注：离心速度和时间取决于细胞种类。

5.用预冷的冻存培养基重新悬浮细胞沉淀，将其调整至该细胞适合的活细胞密度。

6.将细胞悬液分装到若干冻存管中。分装时，应不时轻轻混合细胞，使其保持均匀的细胞悬液状态。

7.使用可控制降温速度的冷冻装置冷冻细胞，使温度每分钟大约降低1°C。或者，将装有细胞的冻存管放入冻存盒中，然后将冻存盒置于-80°C条件下过夜。 
实验材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培养液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml烧杯2个；
3、50ml离心筒2个 

4、培养皿1个，细胞培养瓶1个 

5、1ml ，200μl移液器各1支；枪头盒2个；无菌玻璃搅拌棒1个 

6、细胞计数板1块； 

7、灭好菌的镊子1把，剪刀1把； 

8、酒精灯1台；

细胞培养操作规程：

一．培养基及培养冻存条件准备：

1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。

3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。

二．细胞处理：

1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。天换液并检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：

方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

敌草快标准物质 99.9%CD8(Rat Troponin T) ELISA Kit  小鼠CD8分子豚鼠促微管蛋白聚合蛋白(TPPP)酶联吸附测定试剂盒

己烯雌酚标准物质 99.7％CD25(Rat Troponin T) ELISA Kit  小鼠CD25分子豚鼠二肽肽酶X (DPP10)酶联吸附测定试剂盒

鲑鱼精DNA成分标准物质 2.050mg/gCD20(Rat Troponin T) ELISA Kit  小鼠CD20分子豚鼠胰岛素样生长因子结合蛋白4(IGFBP-4)酶联吸附测定试剂盒

鲑鱼精DNA成分标准物质 2.050mg/gCD14(Rat Troponin T) ELISA Kit  小鼠CD14分子豚鼠Apelin 13(AP13)酶联吸附测定试剂盒  

鲑鱼精DNA成分标准物质 0.998mg/gNGF(Mouse Nerve growth factor) ELISA kit  小鼠神经生长因子豚鼠S100钙结合蛋白B (S100B)酶联吸附测定试剂盒

鲑鱼精DNA成分标准物质 0.501mg/gNT-3(Mouse Neurotrophin 3) ELISA kit  小鼠神经生长因子3豚鼠GATA结合蛋白3(GATA3)酶联吸附测定试剂盒

鲑鱼精DNA成分标准物质 0.100mg/gNT-4(Mouse Neurotrophin 4) ELISA kit  小鼠神经生长因子4豚鼠质金属蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)酶联吸附测定试剂盒

鲑鱼精DNA成分标准物质 0.011mg/gOPG(Mouse Osteoprotegerin) ELISA KIT  小鼠骨保护素豚鼠状旁腺(PTH)酶联吸附测定试剂盒

亮蓝标准溶液0.5mg/ml，溶剂：水BF(Mouse factor B) ELISA Kit  小鼠B因子豚鼠硒蛋白1(SEP1)酶联吸附测定试剂盒

尼泊金乙酯 分析标准品，99.7%OSM(Mouse Oncostatin-M) ELISA KIT  小鼠抑瘤素M豚鼠血小板激活因子(PAF)酶联吸附测定试剂盒

标准溶液 0.97mg/mlPDGFsR- Alpha(Mouse Plaet-Derived Growth Factor Soluble Receptor Alpha) ELISA kit  小鼠血小板衍生生长因子可溶性受体α豚鼠CXC趋化因子受体3(CXCR3)酶联吸附测定试剂盒

敌瘟标准溶液 0.105mg/mlPDGF-AB(Mouse Plaet-Derived Growth Factor AB) ELISA kit  小鼠血小板衍生生长因子AB豚鼠化蛋白激酶C(P-PKC)酶联吸附测定试剂盒

乙硫标准溶液 0.270mg/ml（剧品）P-Selectin/CD62P(Mouse P-Selectin) ELISA kit  小鼠P选择素豚鼠信号识别颗粒(SRP9)酶联吸附测定试剂盒

铒标准溶液 1000μg/mL，体：10%HCLPAL(Mouse L-Phenylalanine ammonla-lyase) ELISA Kit  小鼠L氨解氨酶豚鼠血凝素(HA)酶联吸附测定试剂盒

乙标准溶液 1 mg/ml in methanolsCD30L(Mouse Soluble Cluster of differentiation 30 ligand) ELISA Kit  小鼠可溶性CD30配体豚鼠肌球蛋白轻链9(MYL9)酶联吸附测定试剂盒
A2780/Taxo1细胞单脱氢抗坏血还原酶Elisa试剂盒轴索过度生长抑制因子-A（抗原）MCR/NR3C2/Mineralocorticoid receptor  盐皮质受体抗体

胆色素原脱氨酶Elisa试剂盒轴索过度生长抑制因子受体（多肽抗原）MCPIP1  单核趋化诱导蛋白1抗体

淀粉酶Elisa试剂盒相关死亡促进因子Bad抗原MCP-3/CCL7  单核趋化蛋白3抗体

独脚金内酯Elisa试剂盒相关死亡促进因子Bad抗原MCP-3/CCL7  单核趋化蛋白3抗体

多氧化酶Elisa试剂盒化相关死亡促进因子抗体MCP-2/CCL8  单核趋化蛋白2抗体(小鼠)

多酚氧化酶Elisa试剂盒Bcl-2同源拮抗剂Bak（多肽）MCP-2/CCL8  单核趋化蛋白2抗体

多聚半糖酶Elisa试剂盒一氧化氮合成酶-1（抗原）MCP1/CCL2  单核趋化蛋白1抗体

二核酮糖羧化酶Elisa试剂盒一氧化氮合成酶-2（抗原）MCP1/CCL2  单核趋化蛋白1抗体

二酰甘油Elisa试剂盒蛇巴曲酶抗原MCM7  微小染色体维持缺陷蛋白7抗体