实验材料：
1. 50ml 配制好的RPMI1640培养液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶
2. 100ml烧杯2个；
3、50ml离心筒2个
4、培养皿1个，细胞培养瓶1个
5、1ml ，200μl移液器各1支；枪头盒2个；无菌玻璃搅拌棒1个
6、细胞计数板1块；
7、灭好菌的镊子1把，剪刀1把；
8、酒精灯1台；
|
产品名称 |
规格 |
货号 |
|
U-937细胞 |
T25 |
FS-X3328 |
产品名称：组织细胞**瘤细胞;U-937
形态特性：单核细胞
生长特性：悬浮生长
特征特性：该细胞是由NilssonK实验室于1974年从一名37岁的患有恶性组织细胞性瘤的白人男性的胸水中分离建立的。1979年来的研究显示该细胞在人混合细胞培养物上清、佛波酯、VitD3、γ-IFN、TNF和维A酸的诱导下可以向终末单核细胞分化。该细胞不合成球蛋白，EBV阴性；可产生溶菌酶、β-2-微球蛋白，受PMA刺激后可产生TNF-α；表达C3R；可作转染宿主；表达Fas，对TNF和抗Fas的抗体敏感。
培养条件：RPMI1640+10%FBS
传代方法：维持细胞浓度在1×105~2×106/ml；根据细胞浓度3~4换液1次。
公司细胞现货供应，质量有保证、价格优惠、实验效果好，我司为您提供免费代测服务，同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
冻存培养基：
冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。
1）细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基，其所含胎牛血清和牛血清比例经过优，可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。
2）冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基，含10% DMSO，适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。
培养细胞冻存方案：
以下实验方案介绍了培养细胞冻存的一般流程。详细的实验方案，必须参阅针对具体细胞的产品说明书。
1.配制冻存培养基，于2°C至8°C下储存，直至使用。请注意使用何种冻存培养基取决于所用细胞系。
2.冻存贴壁细胞时，利用传代时所用方法轻柔地使细胞从组织培养容器上脱离下来。用该细胞所需完全培养基重新悬浮细胞。
3.采用血球计数器、细胞计数仪按照台盼蓝拒染法或者使用自动细胞计数仪测定总细胞数和活细胞百分比。根据所需活细胞密度，计算冻存培养基需要量。
4.以大约100-200×g的离心力将细胞悬液离心5至10分钟。在无菌条件下小心倒掉上清液，不要搅动细胞沉淀。
注：离心速度和时间取决于细胞种类。
5.用预冷的冻存培养基重新悬浮细胞沉淀，将其调整至该细胞适合的活细胞密度。
6.将细胞悬液分装到若干冻存管中。分装时，应不时轻轻混合细胞，使其保持均匀的细胞悬液状态。
7.使用可控制降温速度的冷冻装置冷冻细胞，使温度每分钟大约降低1°C。或者，将装有细胞的冻存管放入冻存盒中，然后将冻存盒置于-80°C条件下过夜。
对二标准溶液 0.102mg/ml，体：异辛烷D1R(Mouse Dopamine D1 receptor) ELISA Kit 小鼠多巴D1受体豚鼠核糖核酶III(RNASEN)酶联吸附测定试剂盒
2,5-二硝标准溶液1.00mg/ml,溶剂：ADRA1A(Mouse adrenergic alpha-1A receptor) ELISA Kit 小鼠肾上腺素能a1A受体豚鼠多药耐药相关蛋白1(MRP1)酶联吸附测定试剂盒
邻二标准溶液 0.099mg/ml，体：异辛烷CR(Mouse Calretinin) ELISA Kit 小鼠钙结合蛋白豚鼠血小板衍生生长因子AB(PDGF-AB)酶联吸附测定试剂盒
间二标准溶液 0.114mg/ml，体:异辛烷HABP(Mouse Hya]uronate binding protein) ELISA Kit 小鼠透明质结合蛋白豚鼠抗心脂抗体IgM(ACA-IgM)酶联吸附测定试剂盒
分析标准品，99.3%CyPA(Mouse cyclophilin A) ELISA Kit 小鼠嗜环蛋白/亲环素A豚鼠绒毛膜促性腺(CG)酶联吸附测定试剂盒
标准溶液 101µg/mLBMP-6(Mouse Bone morphogenetic protein 6) ELISA Kit 小鼠骨形成蛋白6豚鼠角质转谷氨酰酶(TGM1)酶联吸附测定试剂盒
标准溶液 1.00mg/mL，体：Mouse lymphocyte factor ELISA Kit 小鼠因子豚鼠胰蛋白酶原II(Try2)酶联吸附测定试剂盒
二标准溶液 1.00mg/mlADH/VP/AVP(Mouse antidiuretic hormone/vasopressin/arginine vasopressin) ELISA Kit 小鼠抗/血管加压素/精氨加压素豚鼠钙调酶结合蛋白1(CABIN1)酶联吸附测定试剂盒
三标准溶液 1.00mg/mlAcSDKP(Mouse N-Acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro) ELISA Kit 小鼠N-乙酰-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨豚鼠解整合素金属蛋白酶9(ADAM9)酶联吸附测定试剂盒
1，1-二乙烯标准溶液 0.800mg/ml，体：PA-IgG/M/A(Mouse plaet antibodies IgG/M/A) ELISA Kit 小鼠抗血小板抗体IgG/M/A豚鼠失调症蛋白质2(ATXN2)酶联吸附测定试剂盒
2,5-二硝标准溶液1.00mg/ml，溶剂：FN(Mouse Fibronectin) ELISA Kit 小鼠纤连蛋白豚鼠AMP活化蛋白激酶α1(PRKAα1)酶联吸附测定试剂盒
标准溶液 99.8µg/mL（剧品）Flt3(Mouse FMS-like tyrosine kinase 3) ELISA Kit 小鼠FMS样酪氨激酶3豚鼠粘蛋白13(MUC13)酶联吸附测定试剂盒
二标准溶液 1.03mg/ml，体：IGFBP-1(Mouse Insulin-like growth factor binding protein 1) ELISA Kit 小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白1豚鼠诺龙/去睾酮(NP)酶联吸附测定试剂盒
1,2-二乙烷标准熔液 1.20mg/ml，体：IGFBP-2(Mouse Insulin-like growth factor binding protein 2) ELISA Kit 小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白2豚鼠脑多巴神经营养因子(CDNF)酶联吸附测定试剂盒
镝标准溶液 1000μg/mlIL-16(Mouse Interleukin 16) ELISA Kit 小鼠白介素16豚鼠糖缺失性转铁蛋白(CDT)酶联吸附测定试剂盒
U-937细胞氢ATP酶Elisa试剂盒血管紧张素Ⅱ-1型受体抗原MEF2D 肌特异性增强因子2D抗体
L-氨解氨酶Elisa试剂盒NFkB诱导的激酶（抗原）MEF2C 肌增强因子2C抗体
NADPH氧化酶Elisa试剂盒活化复制因子1MEF2B 肌增强因子2B抗体
NADP苹果酶Elisa试剂盒神经肽SMEF2A 肌增强因子2抗体
Rubisco活化酶Elisa试剂盒神经激肽B（抗原）MeCP2 化CpG结合蛋白2抗体
UDP-葡萄糖焦化酶Elisa试剂盒活化复制因子2（多肽）Measles virus fusion protein 麻疹病融合蛋白抗体
α酮戊二脱氢酶Elisa试剂盒化活化复制因子2抗原ME1 胞浆苹果酶1抗体
β-1,3-葡聚糖酶Elisa试剂盒神经激肽-B受体（抗原）MDR1/p-GP/CD243 (N-terminus) 多药耐药蛋白/P-糖蛋白抗体
β-葡萄糖苷酶Elisa试剂盒活化转录因子3抗原MDR1/p-GP/CD243 (C-terminus) 多药耐药蛋白/P-糖蛋白抗体(C端)
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。