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稳定细胞株构建方法
日期：2025-06-09 06:21
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摘要：
稳定细胞株构建方法:
一、质粒整合：
1. 筛选系统：常用的筛选系统包括G418、潮霉素、嘌呤霉素等，这些抗生su可以杀死未整合外源基因的细胞，从而筛选出稳定表达的细胞株。
2. 筛选浓度测定：确定抗生su的筛选浓度，通常通过逐步增加抗生su浓度直到细胞全部死亡来确定。
3. 细胞转染：使用转染试剂（如脂质体）将含有筛选标记和目标基因的质粒导入细胞，然后在筛选系统中培养，筛选出整合有外源基因的细胞。
二、逆转录病毒/慢病毒：
1. 慢病毒转染：将人源化的抗体基因转接到慢病毒载体上，...
稳定细胞株构建方法:
一、质粒整合：
1. 筛选系统：常用的筛选系统包括G418、潮霉素、嘌呤霉素等，这些抗生su可以杀死未整合外源基因的细胞，从而筛选出稳定表达的细胞株。
2. 筛选浓度测定：确定抗生su的筛选浓度，通常通过逐步增加抗生su浓度直到细胞全部死亡来确定。
3. 细胞转染：使用转染试剂（如脂质体）将含有筛选标记和目标基因的质粒导入细胞，然后在筛选系统中培养，筛选出整合有外源基因的细胞。
二、逆转录病毒/慢病毒：
1. 慢病毒转染：将人源化的抗体基因转接到慢病毒载体上，使用包装细胞（如293细胞）包装出病毒，然后用病毒转染目的细胞。
2. 筛选与鉴定：病毒转染后，通过抗生su筛选获得稳定细胞株，并进行鉴定。